由于酶具有高度的專(zhuān)一催化活性,故可通過(guò)測定其相應的底物或產(chǎn)物濃度變化,或用某一反應產(chǎn)物或反應物濃度變化來(lái)確定其酶的活性。一般采用電化學(xué)和光物理的方法,即利用反應物或產(chǎn)物的吸光性,用紫外分光光度法或熒光法測定。若酶反應過(guò)程中產(chǎn)物或反應物有氣體,則可用測壓儀(瓦氏呼吸儀)測定。若反應過(guò)程中生成酸,則可用電化學(xué)法。用同位素標記的底物則可用放射化學(xué)法測定底物濃度變化,計算酶活性。一些性質(zhì)穩定的酶,也可用高效液相色譜法檢測。
在科學(xué)研究、工農業(yè)生產(chǎn)和醫學(xué)實(shí)踐中經(jīng)常要進(jìn)行酶的活性測定,因為機體的機能狀況、產(chǎn)品質(zhì)量的好壞常會(huì )在某種或某些酶的含量和活性上得到反映,而這些只有通過(guò)活性測定才能確定,因此酶活性測定具有重要的理論與實(shí)用意義。這類(lèi)分析現已廣泛用于臨床輔助診斷。酶在細胞內合成,各種組織細胞都有體現各自特征的標志酶,這些酶在正常情況下,很少滲出細胞。但當機體發(fā)生病變時(shí),它們在組織和體液內的活性就會(huì )發(fā)生變化,因此,人們可通過(guò)檢定其中某些酶的活性作為早期診斷、鑒別診斷以及預后的參考。以體液內的酶活性為例,引起其改變大致有以下幾種原因。①組織病變導致膜平衡的破壞,如谷草轉氨酶(GOT)在心肌中含量高,但心肌梗死情況下,細胞透性增大,因而患者的血清中GOT顯著(zhù)增高,高峰時(shí)達正常值的10倍以上。②細胞病變引起合成機能異常,例如,一種稱(chēng)為“血漿特異酶”的卵磷脂膽固醇轉?;?LCAT)。它是在肝細胞中合成的,而后分泌到血液中發(fā)揮作用,肝炎患者此酶合成下降,因而它在血清中的水平低于正常。③疾病導致酶的分泌排除受阻,使酶轉而流入血液中,因而它在血清中酶的活性水平改變。如梗阻性黃疸或癌轉移至肝臟使膽管阻塞,故而血清中堿性磷酸酶升高。④藥物直接影響酶活性,如有機磷能不可逆地抑制血清中乙酰膽堿酶。