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土壤淀粉酶(Soil Amylase,S-AL)試劑盒說(shuō)明書(shū)微量法

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                                      規格:100管/48樣

土壤淀粉酶(Soil Amylase,S-AL)試劑盒說(shuō)明書(shū)

微量法

注意:正式測定之前選擇2-3 個(gè)預期差異大的樣本做預測定。

產(chǎn)品內容

試劑一:液體8mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體3mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:液體10mL×1瓶,4℃保存。

產(chǎn)品說(shuō)明

淀粉酶(EC3.2.1.1)是催化淀粉水解的一類(lèi)酶的總稱(chēng)。土壤中的淀粉酶主要來(lái)自于微生物,是一種重要的酶制劑,廣泛應用于糧食加工、食品、釀造、發(fā)酵、紡織品工業(yè)和醫藥行業(yè)。

淀粉酶水解淀粉產(chǎn)生還原糖,可與3,5-二硝基水楊酸反應生成紅棕色物質(zhì),在508nm處有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內與還原糖量成正比。

需自備的儀器和用品:

天平、水浴鍋、低溫離心機、可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、甲苯。

測定操作表:


對照管

測定管

土樣(g)

0.02

0.02

甲苯μL

10

10

25℃靜置15min

試劑μL

110

50

試劑μL


60

充分混勻,37℃震蕩培養1h8000rpm25℃,離心10min

上清液μL

100

100

試劑三(μL

100

100

充分混勻,90℃水浴5min,待冷卻后,于微量石英比色皿/96孔板中測定508nm吸光值,分別記為A對照管和A測定管,△A=A測定管-A對照管。

計算公式:

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

   標準曲線(xiàn):y = 0.2525x - 0.034R= 0.9917

酶活單位定義:每g土樣每天催化生成1mg還原糖為一個(gè)酶活力單位。

S-ALmg/d /g=(△A +0.034)÷ 0.2525×V反總÷W÷T

= 10.464×(△A +0.034)÷W

V反總:反應體系總體積,0.11mLT:反應時(shí)間,1/24dW:樣本質(zhì)量,g

b. 96 孔板測定的計算公式如下

標準曲線(xiàn):y = 0.1263x - 0.034R= 0.9917

酶活單位定義:每g土樣每天催化生成1mg還原糖為一個(gè)酶活力單位。

S-ALmg/d/g=(△A +0.034)÷ 0.1263×V反總÷W÷T

=20.928×(△A +0.034)÷W

V反總:反應體系總體積,0.11mLT:反應時(shí)間,1/24d; W:樣本質(zhì)量,g

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